脂肪測定——索式提取法（經(jīng)典方法）

　　實驗概要
 

　　本文介紹了脂肪測定——索式提取法(經(jīng)典方法)的原理、步驟及注意事項等。
 

　　實驗原理
 

　　樣品經(jīng)前處理后，放入圓筒濾紙內(nèi)，將濾紙筒置于索式提取管中，利用yimi或石油醚在水浴中加熱回流，使樣品中的脂肪進入溶劑中，回收溶劑后所得到的殘留物，即為脂肪(粗脂肪)。采用這種方法測出游離態(tài)脂，此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發(fā)油、糖脂等物質(zhì)，所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪。
 

　　索氏提取法適用于脂類含量較高，結(jié)合態(tài)的脂類含量較少，能烘干磨細，不宜吸濕結(jié)塊的樣品的測定。此法只能測定游離態(tài)脂肪，而結(jié)合態(tài)脂肪無法測出，要想測出結(jié)合態(tài)脂肪需在一定條件下水解后變成為游離態(tài)的脂肪方能測出。另外此法是經(jīng)典方法，對大多數(shù)樣品結(jié)果比較可靠，但需要周期長，溶劑量大。
 

　　實驗步驟
 

　　1. 濾紙筒的制備
 

　　將濾紙剪成長方形8×375px ，卷成圓筒，直徑為150px，將圓筒底部封好，最好放一些脫脂棉，避免向外漏樣。
 

　　2. 稱取樣品，將樣品烘干磨細，稱取一定量與紙筒封好上口，最好用測定水的樣品。
 

　　3. 索式抽提器的準備
 

　　索氏抽提器由三部分組成，回流冷凝管、提取管、提脂瓶組成。提脂瓶在使用前需烘干并稱至恒重。其它要干燥。
 

　　4. 抽提
 

　　將裝好樣的紙筒放入抽提管 ， 倒入yimi的量從提取管加入，加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置，在恒溫水浴中抽提，水浴溫度大約為55℃左右，可用濾紙檢驗，理論值抽提6-8小時，實際值3-4小時，但也根據(jù)樣品性質(zhì)來決定。
 

　　5. 回收yimi
 

　　當yimi在提取管內(nèi)即將虹吸時立即取下提取管，將其下口放到y(tǒng)imi回收瓶內(nèi)，使之傾斜，然后將提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。
 

　　6. 計算
 

　　脂肪%= (W2-W1)/W x 100
 

　　W2——瓶和樣品重(g)W1——瓶子重量(g)  W——樣品重量(g)
 

　　濾紙筒應事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恒重。
 

　　注意事項
 

　　1. 樣品應干燥后研細，裝樣品的濾紙筒一定要緊密，不能往外漏樣品，否則重做。
 

　　2. 放入濾紙筒的高度不能超過回流彎管，否則yimi不易穿透樣品，使脂肪不能全部提出，造成誤差。
 

　　3. 碰到含多糖及糊精的樣品要先以冷水處理，等其干燥后連同濾紙一起放入提取器內(nèi)。
 

　　4. 提取時水浴溫度不能過高，一般使yimi剛開始沸騰即可(約45℃左右)，回流速度以8-12次/時為宜。
 

　　5 所用yimi必需是無水yimi，如含有水分則可能將樣品中的糖以及無機物抽出，造成誤差。
 

　　6. 若用干樣品測定脂肪，可按下式計算原來樣品脂肪的含量